Kedelai agar tripticaseína fondasi, persiapan dan penggunaan



itu agar kedelai trypticasein atau trypticase soy agar adalah media kultur padat, tidak selektif dan bergizi. Ditandai dengan huruf TSA untuk akronimnya dalam Bahasa Inggris Trypticase Soy Agar. Ini terdiri dari triptein, pepton kedelai, natrium klorida dan agar-agar.

Karena daya nutrisinya yang tinggi, ia sangat ideal untuk budidaya mikroorganisme yang cukup banyak dan tidak banyak menuntut. Media tanpa suplemen tambahan tidak direkomendasikan untuk kultur primer, tetapi sangat berguna untuk mensubkultur galur murni dan membuatnya tetap hidup, di antara kegunaan lain.

Juga, agar ini berfungsi sebagai dasar untuk persiapan media yang diperkaya seperti agar darah, terutama ketika diperlukan untuk mengamati pola hemolisis dan untuk memasang taksa optoquine dan bacitracin, yang diperlukan dalam diagnosis Streptococcus pneumoniae dan Streptococcus pyogenes masing-masing.

Di sisi lain, ketika dikombinasikan dengan antibiotik, penting untuk mengisolasi mikroorganisme fakultatif dan ketat yang secara klinis penting dari sampel dengan flora campuran..

Akhirnya, komposisi agar kedelai tripticasein dan kinerjanya memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh farmakope yang berbeda (Eropa, Jepang dan Amerika Utara).

Indeks

  • 1 Yayasan
  • 2 Persiapan
    • 2.1 Piring agar kedelai Tripticasein
    • 2.2 Pelat agar kedelai Tripticasein ditambah dengan darah
    • 2.3 Piring agar kedelai Tripticasein ditambah dengan darah panas
    • 2.4 Irisan agar kedelai triptaseasein
  • 3 Penggunaan
  • 4 Diunggulkan
  • 5 Kontrol kualitas
    • 5.1 Kontrol sterilitas
    • 5.2 Kontrol pertumbuhan
    • 5.3 Kontrol pertumbuhan dan pola hemolisis agar-agar kedelai triptikasein yang dilengkapi dengan darah
  • 6 Referensi

Yayasan

Untuk pengembangan bakteri yang tepat diperlukan adanya kontribusi energi, seperti asam amino, vitamin, basa purin dan pirimidik..

Dalam hal ini, triptein dan pepton kedelai menyediakan nutrisi ini untuk mikroorganisme, sehingga memungkinkan pengembangan penuhnya. Namun, untuk bakteri yang menuntut perlu untuk melengkapi agar ini dengan darah defibrinasi atau darah panas untuk meningkatkan pengayaannya.

Di sisi lain, jika antibiotik ditambahkan ke media, itu menjadi media selektif. Anda juga dapat menambahkan 0,6% ekstrak ragi untuk mendukung isolasi spesies dari genus Listeria, sambil menambahkan sistin telurium dan Darah domba sangat ideal untuk Corynebacterium diphteriae.

Akhirnya, natrium klorida memberikan keseimbangan osmotik ke medium dan agar-agar memberikan konsistensi yang solid.

Persiapan

Piring agar kedelai Tripticasein

Untuk menyiapkan agar kedelai trypticasein, 40 gram media komersial dehidrasi harus ditimbang dalam skala digital. Larutkan dalam liter air suling yang terkandung dalam fiola.

Campuran dibiarkan selama 5 menit dan kemudian dibawa ke sumber panas untuk membantu pembubaran media. Ini harus sering diaduk dan dibiarkan mendidih selama 1 atau 2 menit. Selanjutnya, media disterilkan dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 menit.

Biarkan dingin hingga 50 ° C dan distribusikan dalam cawan Petri steril. Biarkan mengeras, balikkan, pesan dengan plakat dan simpan di lemari es.

PH akhir medium harus 7,3 ± 0,2.

Harus diperhitungkan bahwa warna media kultur yang didehidrasi berwarna krem ​​muda dan harus disimpan antara 10 hingga 35 ° C, di tempat yang kering..

Untuk bagiannya, agar yang disiapkan berwarna kuning muda. Piring yang sudah disiapkan harus disimpan dalam lemari es (2 hingga 8 ° C) sampai digunakan.

Pelat harus mencapai suhu kamar sebelum digunakan.

Piring agar kedelai Tripticasein ditambah dengan darah

Agar darah dibuat dengan menambahkan 5% defibrinasi darah pada saat pendinginan agar kedelai trypticasein pada suhu 50 ° C. Campuran dihomogenisasi dengan memutar dengan gerakan lembut.

Sajikan dalam cawan petri steril. Warna media harus merah ceri.

Piring agar kedelai Tripticasein ditambah dengan darah panas

Untuk menyiapkan agar darah berbasis TSA, prosedur yang dijelaskan di atas adalah sama, tetapi ketika meninggalkan autoklaf itu dibiarkan tetap sampai suhu medium kira-kira antara 56 dan 70 ° C. Pada saat itu darah ditempatkan dan dicampur sampai media berubah warna menjadi coklat.

Sajikan dalam cawan petri steril. Warna mediumnya adalah cokelat cokelat.

Irisan agar-agar kedelai triptikasein

Prosedur untuk membuat agar adalah sama dengan yang dijelaskan untuk piring, dengan perbedaan bahwa alih-alih menyajikan media pada cawan Petri, itu didistribusikan antara 10 dan 12 ml dalam tabung dengan tutup Bakelite sebelum sterilisasi..

Selanjutnya, tabung diautoklaf pada 121 ° C selama 15 menit. Ketika pergi, mereka bersandar dengan bantuan dukungan dan membiarkan diri mereka mengeras.

Irisan yang disiapkan ditaburkan di permukaan dan berfungsi untuk mempertahankan mikroorganisme tertentu yang tidak menuntut, untuk waktu yang ditentukan.

Penggunaan

Agar kedelai trypticasein digunakan dalam kasus-kasus berikut:

-Sebagai dasar untuk menyiapkan agar darah klasik yang digunakan secara rutin di sebagian besar laboratorium.

-Isolasi bakteri yang banyak.

-Pengamatan pola hemolisis.

-Eksekusi tes diagnostik.

-Sebagai dasar untuk mempersiapkan agar darah khusus Corynebacterium diphteriae, dengan telurium sistin dan darah domba.

-Sebagai dasar untuk mempersiapkan agar darah domba, lebih banyak kanamisin-vankomisin untuk pertumbuhan anaerob, terutama Bacteroides sp.

-Untuk pemeliharaan strain yang tidak banyak menuntut (Bacterioteca).

-Jumlah aerobik mikroba dalam studi batas mikroba dari sampel air, lingkungan, makanan dan kosmetik.

Ditaburkan

Sampel dapat diunggulkan langsung pada permukaan agar kedelai trypticasein ditambah dengan darah atau zat tambahan lainnya. Ditaburkan karena kelelahan.

Padahal, piring agar kedelai tripticasein tanpa aditif umumnya digunakan untuk strain mikroba subkultur (bakteri atau ragi).

Kontrol kualitas

Kontrol sterilitas

Untuk memeriksa sterilitas media berbeda yang disiapkan dengan agar kedelai trypticasein, disarankan untuk melakukan hal berikut: dari setiap batch yang disiapkan, satu atau dua piring atau tabung harus diinkubasi tanpa inokulasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam untuk menunjukkan sterilitas. Dalam semua kasus itu harus tetap tanpa pertumbuhan.

Jika ditemukan kontaminasi, seluruh lot harus dibuang.

Kontrol pertumbuhan

Untuk mempelajari berfungsinya agar kedelai trypticasein, strain bakteri berikut dapat digunakan: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 dan Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Strain ditaburkan dan diinkubasi dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C selama 24 jam.

Dalam semua kasus, pertumbuhan harus memuaskan.

Anda juga bisa menggunakan jamur sebagai Kompleks Candida albicans ATCC 10231 dan Aspergillus niger ATCC 16404. Pertumbuhan yang baik diharapkan untuk kedua strain.

Kontrol pertumbuhan dan pola hemolisis agar kedelai triptikasein ditambah dengan darah

Untuk memverifikasi berfungsinya agar darah yang disiapkan dengan basis ini, strain berikut dapat digunakan: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 dan Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Mereka ditaburkan dan diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam microaerophilicus selama 24 jam.

Dalam semua kasus, pertumbuhan harus memuaskan, dengan mempertimbangkan bahwa dalam S. pyogenes beta-hemolisis (membersihkan halo di sekitar koloni) dan pada kedua strain S. pneumoniae alfa hemolisis (lingkaran kehijauan di sekitar koloni) harus diamati.

Referensi

  1. Kontributor Wikipedia. Trypticase Saya Agar. Wikipedia, Ensiklopedia Gratis. 17 Desember 2018, 15:47 UTC. Tersedia di: https://en.wikipedia.org
  2. Laboratorium Britania. Tryteine ​​soy agar. 2015. Tersedia di: britanialab.com
  3. Laboratorium Neogen Triptych kedelai. Tersedia di: foodsafety.neogen.com
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Editorial Panamericana S.A.
  5. Laboratorium BD Trypticase I am Agar. 2014. Tersedia di: .bd.com