Agar Salmonella-Shigella foundation, persiapan dan penggunaan



itu Agar Salmonella-Shigella juga dikenal sebagai SS agar, adalah media selektif dan diferensial sedang, yang dirancang khusus untuk isolasi bakteri enteropatogen dari genus Salmonella dan Shigella, dari sampel lingkungan dan klinis..

SS agar memiliki komposisi yang kompleks; Ini terdiri dari ekstrak daging, pepton, laktosa, garam empedu, natrium sitrat, natrium tiosulfat, besi sitrat, agar, merah netral, hijau cerah, dan air suling. Dengan selektivitasnya yang besar, dimungkinkan untuk menanam sampel dengan flora campuran yang berlimpah.

Di laboratorium mikrobiologi media Salmonella-Shigella banyak digunakan untuk menyelidiki keberadaan Salmonella dan Shigella dalam sampel tinja diare, limbah, air minum dan makanan..

Kadang-kadang perlu untuk menggunakan kaldu pra-pengayaan (lactose kaldu) dan pengayaan (kalen selenit sistin) untuk memulihkan strain Salmonella.

Langkah-langkah ini diperlukan ketika keberadaan Salmonella dicurigai dalam jumlah yang sangat rendah, atau di mana strain mungkin diperlakukan dengan buruk oleh proses khas produksi industri, terutama makanan olahan. Juga disarankan untuk memperkaya sampel tinja dari pasien yang telah diobati dengan antibiotik.

Selanjutnya, kaldu yang diperkaya dapat diunggulkan pada agar Salmonella-Shigella dan media sejenis lainnya, seperti agar xylose, deoxysiloxane lysine (XLD) dan enteric Hektoen agar (HE).

Indeks

  • 1 Yayasan
    • 1.1 Kekuatan gizi
    • 1.2 Konsistensi
    • 1.3 Selektif
    • 1.4 Diferensial
  • 2 Persiapan
  • 3 Gunakan
  • 4 Keterbatasan
  • 5 Kontrol kualitas
  • 6 Referensi

Yayasan

Setiap komponen media kultur Salmonella-Shigella memiliki fungsi spesifik, dan campuran secara keseluruhan memberikan sifat yang mencirikannya..

Kekuatan bergizi

Ekstrak daging dan pepton (kasein dan jaringan hewan yang dicerna) menyediakan nutrisi yang dibutuhkan (nitrogen, karbon, dan vitamin) untuk pengembangan mikroorganisme yang mampu mentoleransi sisa komponen.

Konsistensi

Agar-agar bertanggung jawab untuk memberikan konsistensi padat pada medium.

Selektif

Media ini sangat selektif karena mengandung garam empedu, natrium sitrat dan hijau cerah. Oleh karena itu, ia menghambat pertumbuhan semua bakteri Gram-positif dan sebagian besar basil Gram-negatif, termasuk beberapa koliform.

Sementara bakteri dari genus Salmonella dan beberapa jenis Shigella mendukung senyawa-senyawa ini.

Terutama, genus Salmonella sangat tahan terhadap garam empedu, sangat banyak sehingga mereka dapat hidup di kantong empedu dari beberapa pasien pembawa yang terus-menerus mengeluarkan bakteri melalui kotoran..

Diferensial

Laktosa adalah karbohidrat yang dapat difermentasi yang membantu membedakan strain fermentasi laktosa dari strain yang tidak memfermentasi. Sifat ini dibuktikan dengan adanya indikator pH, yang dalam medium ini adalah fenol merah.

Strain fermentasi laktosa menghasilkan koloni merah, sedangkan strain non-fermentasi tidak berwarna. Karakteristik ini penting, karena Salmonella dan Shigella tidak memfermentasi laktosa.

Di sisi lain, media ini mengandung natrium tiosulfat sebagai sumber belerang dan besi sitrat sebagai sumber zat besi. Kedua senyawa ini mampu membedakan bakteri yang mampu menghasilkan hidrogen sulfida. Ini bereaksi untuk membentuk endapan hitam sulfida besi yang tidak larut dan terlihat.

Properti ini memiliki beberapa strain dari genus Salmonella. Biasanya koloni mereka berwarna datar dengan titik hitam di tengahnya. Sisa Salmonellas tidak menghasilkan H2S dan berkembang sebagai koloni tak berwarna.

Di sisi lain, koloni dari genus Shigella tidak berwarna tanpa penghitam.

Persiapan

Ini artinya sangat sederhana untuk dipersiapkan.

Timbang 63 gr media komersial kering dan larutkan dalam satu liter air suling. Panaskan larutan dan aduk. Campuran dapat mencapai titik didih hingga beberapa menit.

Media ini tidak boleh diautoklaf. Setelah pembubaran itu disajikan langsung pada piring steril tunggal atau ganda.

Ketika mengeras, mereka disusun dengan cara terbalik di pembuat plak dan disimpan dalam lemari es (2-8 ° C) sampai mereka digunakan.

Media setelah persiapan harus pH 7,2 ± 0,2 dan oranye merah.

Penting untuk membiarkan lempeng menjadi marah sebelum menabur sampel. Anda dapat langsung menyemai sampel asli, mengeluarkan bahan pada bagian agar-agar dan kemudian dari sana berjuang karena kelelahan.

Jika menggunakan kaldu yang diperkaya, berikan sebagian kaldu selenit dan tabur dengan drigalski spatula.

Inkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam dalam aerobiosis.

Ingatlah bahwa jumlah gram yang ditimbang dan pH akhir media dapat bervariasi dari satu rumah komersial ke yang lain. Pelat dasar media selalu membawa indikasi untuk persiapannya.

Gunakan

Ini sering digunakan dalam analisis kultur tinja dan dalam studi mikrobiologi sampel air residu, air minum dan makanan.

Seringkali dua piring disiapkan, di satu sisi agar Salmonella-Shigella ditempatkan dan di sisi lain agar XLD.

Keterbatasan

-Beberapa strain Shigella tidak tumbuh di media ini. Oleh karena itu, tidak dianjurkan untuk isolasi primer genus ini.

-Tidak setiap koloni yang jelas dengan pusat hitam menunjukkan Salmonella; tes biokimia harus dilakukan untuk membuat identifikasi yang benar, karena koloni dari beberapa jenis Proteus tidak dapat dibedakan dari yang dari Salmonella.

-Media dehidrasi harus hati-hati terhadap paparan terhadap lingkungan, karena sangat higroskopis. Karena itu, ia harus disimpan di lingkungan yang kering dan tertutup rapat. Terbuka untuk periode yang sangat singkat.

-Seiring waktu garam empedu dalam media dapat mengendap, membentuk gambar yang mirip dengan kusut dalam agar-agar, tetapi ini tidak mempengaruhi hasil.

-Beberapa jenis Shigella perlahan bisa memfermentasi laktosa.

Kontrol kualitas

Untuk membuktikan bahwa media bekerja dengan benar, disarankan untuk menanam strain kontrol yang dikenal atau bersertifikat dan mengamati apakah pertumbuhannya memenuhi karakteristik yang diharapkan..

Untuk tujuan ini, alunan E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Hasil yang diharapkan adalah:

Escherichia coli --koloni cembung merah muda.

Enterobacter dan Klebsiella- koloni besar dan mukoid merah atau merah muda.

Shigella flexneri --koloni datar yang jelas atau tidak berwarna.

Salmonella typhimurium - koloni tidak berwarna dengan pusat hitam.

Enterococcus faecalis-- penghambatan total.

Referensi

  1. Laboratorium Difco Francisco Soria Melguizo. Agar Salmonella-Shigella. 2009. Tersedia di: f-soria.es
  2. Laboratorium BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Tersedia di: bd.com
  3. Laboratorium Britania. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Tersedia di: britanialab.com
  4. Diagnostik Valtek. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar) .2010. Tersedia di: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. Edisi ke-5. Editorial Panamericana S.A. Argentina.