Garam agar dan fondasi manitol, persiapan dan penggunaan



itu agar garam dan manitol atau manitol asin adalah media kultur padat, selektif dan diferensial. Itu dibuat oleh Chapman untuk isolasi cocci Gram positif patogen, terutama Staphylococcus aureus.

Namun, juga berguna untuk mengisolasi Staphylococcus epidermidis, yang kadang-kadang dapat hadir sebagai patogen oportunistik, dan Staphylococcus saprophyticus, diakui patogen kemih, di antara spesies lain.

Beberapa Enterococcus dapat tumbuh di media ini, serta basil pembentuk spora Gram positif.

Media ini sangat berguna dalam analisis sampel klinis, tetapi juga digunakan dalam studi mikrobiologis makanan dan kontrol kualitas produk industri, seperti kosmetik, obat-obatan, dan lain-lain..

Agar manitol asin terdiri dari ekstrak dan pepton daging sapi, triptein, manitol, natrium klorida, fenol merah dan agar.

Indeks

  • 1 Yayasan
  • 2 Persiapan
  • 3 Penggunaan
  • 4 Kontrol kualitas
  • 5 Pertimbangan akhir
  • 6 Referensi

Yayasan

Agar Mannitol selektif berkat tingginya garam yang dimilikinya. Salinitas bertindak sebagai zat penghambat dan mencegah pertumbuhan bakteri Gram-negatif.

Ini juga berbeda karena adanya karbohidrat manitol dan indikator pH fenol merah. Dari ini, bakteri yang mampu memfermentasi manitol menghasilkan asam, mengasamkan media, mengubah koloni dan media kuning..

Di sisi lain, koloni yang tidak memfermentasi manitol tumbuh dalam medium yang mengambil nutrisi yang disediakan oleh ekstrak dan peptona daging dan tripteína. Dari sana bakteri mengekstrak karbon, nitrogen, vitamin dan mineral yang diperlukan untuk pertumbuhan mereka.

Koloni dalam kasus ini mungkin lemah atau merah muda yang kuat, dan medianya tetap berwarna sama atau berubah menjadi fuchsia.

Agar adalah zat yang memberikan konsistensi pada medium.

Persiapan

Untuk menyiapkan satu liter agar mannitol asin, 111 g media dehidrasi dari rumah komersial pilihan ditimbang dan dilarutkan dalam 1000 ml air suling, menggunakan fiola.

Panas diterapkan dengan sering mengeluarkan media untuk meningkatkan proses disolusi. Biarkan mendidih sebentar.

Tempatkan fiola di dalam autoclave pada 121 ° C selama 15 menit.

Pada akhir waktu, fiola dikeluarkan dari autoklaf, dibiarkan berdiri dan disajikan antara 15 dan 20 ml pada cawan petri steril ketika suhu sekitar 50 hingga 55 ° C.

Itu diperbolehkan untuk mengeras, memesan dalam bentuk terbalik di plaqueros dan menyimpan di lemari es sampai digunakan. Sebelum menanam sampel, Anda harus menunggu lempeng mengambil suhu lingkungan.

Pelat ditaburkan dengan pergoresan atau dengan menabur di permukaan dengan spatula drigalski. PH akhir dari media yang disiapkan harus 7,4 ± 0,2

Warna medium yang didehidrasi berwarna krem ​​muda dan warna medium yang dipersiapkan berwarna merah oranye.

Penggunaan

Karena selektivitasnya yang tinggi, media ini sangat ideal untuk menanam sampel dengan campuran flora di mana orang ingin mencari keberadaannya Staphylococcus aureus, sebagai patogen utama genus ini.

Dalam hal ini, salah satu kegunaannya yang paling sering adalah dalam analisis mikrobiologis sampel eksudat faring dan pelepasan hidung, terutama untuk mendeteksi pembawa asimptomatik dari S. aureus.

Beberapa negara telah menerapkan analisis ini sebagai persyaratan wajib bagi orang yang ingin bekerja sebagai penjual makanan.

Kontrol ini mencegah perekrutan orang yang menjadi pembawa S. aureus, sehingga menghindari keracunan makanan besar-besaran, karena konsumsi makanan yang terkontaminasi dengan enterotoksin stafilokokus.

Ini juga dapat dimasukkan dalam penyemaian infeksi luka, kultur darah, CSF, lavage bronchoalveolar, antara lain..

Agar manitol asin berguna untuk mengisolasi kembali koloni kultur urin dari agar CLED atau agar darah yang Gramnya telah mengungkap kokus Gram-positif dalam kelompok..

Ini juga berlaku dalam analisis mikrobiologis makanan, air minum, tanah, di antara aplikasi lain.

Kontrol kualitas

Setelah batch piring dengan agar mannitol asin disiapkan, disarankan untuk melakukan kontrol kualitas. Strain kontrol ditaburkan untuk menunjukkan apakah ada pertumbuhan atau tidak.

Sebagai kontrol positif, strain diketahui Staphylococcus aureus. Ini harus tumbuh dengan memuaskan dengan mengembangkan koloni kuning, dan medianya juga menjadi warna yang sama.

Demikian juga, lebih mudah untuk memasukkan strain diketahui Staphylococcus epidermidis. Ini harus tumbuh dengan memuaskan dengan mengembangkan koloni merah muda, dan mediumnya tetap berwarna sama atau lebih gelap di merah muda yang lebih kuat.

Sebagai kontrol negatif, strain digunakan yang tidak boleh tumbuh di media ini. Misalnya, Anda dapat menanam jenis yang dikenal Escherichia coli atau Klebsiella pneumoniae. Hasil yang diharapkan adalah penghambatan total, yaitu, tidak ada pertumbuhan.

Selain itu, piring tanpa inokulasi harus diinkubasi. Di dalamnya seharusnya tidak ada pertumbuhan, tidak ada perubahan warna.

Adalah penting bahwa pelat tidak digunakan jika ada indikasi kerusakan, seperti kontaminasi, dehidrasi, perubahan warna, antara lain..

Pertimbangan terakhir

Saat menggunakan media agar mannitol asin, beberapa aspek penting harus dipertimbangkan:

-Memperoleh pertumbuhan koloni kuning tidak mengindikasikan itu Staphylococcus aureus. Harus diingat bahwa beberapa strain Enterococcus dapat tumbuh dalam medium ini dan fermentasi mannitol, serta basil pembentuk spora Gram positif tertentu..

Karena itu, penting untuk melakukan Gram ke koloni dan tes katalase.

-Di sisi lain, harus dipertimbangkan bahwa spesies Staphylococcus lain berbeda aureus Mereka juga mampu memfermentasi manitol. Oleh karena itu, penting untuk menumbuhkan koloni ke kaldu nutrisi untuk diambil dari sana dan melakukan tes koagulase.

Di antara spesies Staphylococcus yang memiliki kepentingan klinis bagi mannitol yang difermentasi adalah: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp kapitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, antara lain.

Yang lain mungkin memberikan reaksi variabel, yaitu, kadang-kadang positif dan kadang-kadang negatif. Ada beberapa S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, antara lain.

-Tidak disarankan untuk mengambil koloni langsung dari manitol agar untuk melakukan tes koagulase, karena konsentrasi garam yang tinggi dari media dapat mengganggu hasil..

-Akhirnya, direkomendasikan untuk menginkubasi piring yang diunggulkan dengan manitol asin hingga 48 jam, karena beberapa jenis S. aureus Mereka dapat memfermentasi manitol secara perlahan, meskipun ini tidak terlalu sering.

Referensi

  1. Laboratorium Britania. Agar asin Mannitol. 2015. Tersedia di: britanialab.com
  2. "Asin Mannitol Agar". Wikipedia, Ensiklopedia gratis. 31 Okt 2018, 19:08 UTC. 17 Jan 2019, 20:55, tersedia di: en.wikipedia.org.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Editorial Panamericana S.A
  5. Laboratorium BD BD Agar Garam Mannitol. 2013. Tersedia di: bd.com.