Foundation agar bergizi, persiapan dan penggunaan
itu agar bergizi ini adalah media kultur padat non-selektif dan non-diferensial. Dalam lingkungan ini tumbuh semua jenis bakteri tidak menuntut dari sudut pandang gizi.
Ini adalah cara sederhana dan, meskipun namanya, mengandung nilai gizi yang lebih rendah dibandingkan dengan media serupa lainnya, seperti agar infus jantung otak atau agar kedelai trypticase.
Kegunaannya di laboratorium sangat bervariasi. Terutama digunakan untuk subkultur spesies, pemeliharaan strain, penghitungan koloni, sebagai dasar untuk mempersiapkan agar darah, antara lain.
Demikian juga, karena warna krem terang, produksi pigmen yang dihasilkan oleh beberapa strain bakteri, seperti pigmen kehijauan dari Pseudomonas aeruginosa, pigmen merah bata yang diproduksi oleh Serratia marcescens pada suhu kamar, pigmen kuning keemasan Staphylococcus aureus, antara lain.
Selain itu, ini adalah salah satu media pertumbuhan paling ekonomis yang ditemukan di pasar.
Indeks
- 1 Yayasan
- 2 Komposisi
- 3 Persiapan
- 4 Penggunaan
- 4.1 Sebagai dasar untuk persiapan agar darah
- 4.2 Merangsang sporulasi bakteri pembentuk spora
- 4.3 Pemeliharaan regangan
- 4.4 Penghitungan koloni
- 4.5 Eksekusi tes diagnostik
- 4.6 Pemulihan perairan salin rekreasi aerobik mesofilik (Pantai)
- 5 Referensi
Yayasan
Seperti yang telah disebutkan, itu adalah cara yang sangat sederhana yang didasarkan pada penyediaan zat gizi untuk pertumbuhan bakteri tanpa batasan dan tanpa reaksi kompleks untuk menafsirkan.
Karena medianya tembus cahaya, ia sangat ideal untuk menghitung koloni dengan metode penaburan dengan kedalaman.
Komposisi
Ini terutama terdiri dari ekstrak daging atau ekstrak ragi, pepton atau pencernaan gelatin pankreas, agar-agar, natrium klorida dan air suling.
Ekstrak daging atau ragi dan pepton mewakili sumber karbon dan mineral esensial (nitrogen, fosfor dan sulfur), yang akan digunakan oleh bakteri sebagai sumber energi dan faktor pertumbuhan..
Demikian juga, agar-agar adalah dasar dari semua media tumbuh padat, menggantikan gelatin, yang merupakan senyawa basa pertama yang digunakan oleh Robert Koch untuk memberikan konsistensi padatan medianya..
Agar adalah polisakarida yang terdiri dari galaktosa, galaktomanan, agarosa dan agaropektin. Set pada 40 ° C dan meleleh mendekati 100 ° C.
Untuk bagiannya, natrium klorida menyediakan medium dengan osmolaritas yang diperlukan untuk pengembangan bakteri.
Akhirnya, air berfungsi untuk menghidrasi dan melarutkan senyawa yang terliofilisasi. Air suling yang disesuaikan dengan pH netral harus digunakan. Air keran tidak boleh digunakan karena mengandung kalsium dan magnesium yang dapat bereaksi dengan fosfat dalam medium dan membentuk garam yang tidak larut.
Persiapan
Untuk satu liter agar nutrisi, 31 g media kering harus ditimbang. Ditempatkan dalam fiola dan dilarutkan dalam satu liter air suling. Setelah 5 menit istirahat, panaskan di atas sumber panas dan aduk terus hingga mendidih selama 1 atau 2 menit.
Kemudian masukkan fiola ke dalam autoclave dan sterilkan pada 121 ° C selama 20 menit.
Pada akhir waktu, itu dihapus dari autoclave dan disajikan dalam cawan petri steril, menggunakan tudung aliran laminar atau pembakar Bunsen..
Jika cawan Petri pakai (plastik) media harus didistribusikan ketika agar memiliki suhu sekitar 50 ° C, untuk mencegah mereka cacat akibat panas yang berlebihan.
Biarkan mengeras dan disimpan dalam wadah piring terbalik dan dinginkan pada 2-8 ° C sampai digunakan.
Piring-piring itu harus ditempa sebelum ditabur. Piring agar bergizi tidak boleh digunakan jika terkontaminasi atau mengalami dehidrasi.
PH media yang disiapkan harus disesuaikan menjadi 7,3 ± 0,2.
Penggunaan
Ini adalah media kultur paling sederhana yang digunakan di laboratorium mikrobiologi. Formulasinya sangat baik untuk pertumbuhan bakteri yang tidak banyak menuntut.
Kegunaan utamanya dijelaskan di bawah ini:
Sebagai dasar untuk persiapan agar darah
Media ini kadang-kadang digunakan sebagai basa untuk mempersiapkan agar darah, namun itu bukan basa yang paling umum digunakan.
Merangsang sporulasi bakteri pembentuk spora
Media kultur ini sangat berguna untuk merangsang sporulasi bakteri pembentuk spora seperti Bacillus sp.
Untuk melakukan ini, galur genus ditanam Bacillus dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 ° C dalam aerobiosis. Setelah koloni ditanam, pelat mengalami tekanan oleh suhu, yaitu suhu kompor meningkat menjadi 44 ° C dan dibiarkan selama 24 jam lebih atau dimasukkan ke dalam lemari es selama 24 jam..
Pada akhir panen, biakan diperluas dan diwarnai dengan pewarnaan Gram atau pewarna spora Shaeffer-Fulton. Di dalamnya, basil dengan endospora (spora di dalam basil) dan exospora (spora di luar basil) akan diamati..
Perawatan regangan
Beberapa laboratorium penelitian atau laboratorium pendukung pengajaran universitas perlu memelihara bakteri yang penting secara klinis selama mungkin, untuk menggunakan bank bakteri (bacteriotheca) untuk pekerjaan penelitian atau untuk persiapan praktik pengajaran. Siswa akan belajar memanipulasi dan mengidentifikasi mikroorganisme ini.
Agar nutrisi, serta agar infus jantung otak, dapat digunakan untuk tujuan ini. Agar dibuat, dituangkan ke dalam tabung yang ditutup bakelite dan dimiringkan pada alas, sedemikian rupa agar agar mengeras membentuk blok di bagian bawah dan bevel pada permukaan (puncak seruling).
Setiap tabung diberi label dengan menempatkan nama bakteri yang akan ditanam dan tanggal. Pada bezel masing-masing bakteri akan ditanam dan diinkubasi selama 24 jam, setelah koloni tumbuh tabung disimpan pada suhu kamar.
Bakterioteca harus diperbarui dari 1 hingga 3 bulan, untuk menghindari kontaminasi dan dehidrasi medium dan juga kematian bakteri.
Hanya bakteri yang tidak menuntut yang dapat dipelihara dengan cara ini.
Penghitungan koloni
Meskipun ada cara khusus untuk menghitung koloni, seperti agar hitungan standar, agar gizi dapat digunakan untuk tujuan ini, baik dengan menabur permukaan dengan spatula drigalski atau dengan kedalaman. Karena itu, sangat berguna dalam analisis mikrobiologis makanan dan air.
Eksekusi tes diagnostik
Karena merupakan media yang tidak mengandung darah, atau zat tambahan lainnya, sangat ideal untuk mengambil koloni yang tumbuh di media ini untuk melakukan uji katalase..
Demikian juga, karena warnanya yang jernih, diindikasikan untuk melakukan tes oksidase langsung pada area agar yang diunggulkan, tanpa gangguan..
Pemulihan perairan salin mesofilik aerobik rekreasi (Pantai)
Nutrient agar yang disiapkan dengan air laut 10% berguna untuk evaluasi aerob mesofilik di perairan pantai.
Dengan cara ini, kita dapat menghargai tingkat kontaminasi nyata yang dimiliki perairan dengan mikroorganisme ini, karena dalam jenis sampel hasilnya tumpang tindih ketika menggunakan media kultur yang disiapkan dengan cara konvensional..
Ini ditunjukkan oleh Cortez et al. pada 2013 dalam makalah penelitian.
Hal ini dapat dijelaskan karena perubahan mendadak yang dialami bakteri ketika berpindah dari lingkungan yang hiper-salin ke lingkungan yang rendah garam, oleh karena itu mikroorganisme memasuki kondisi kelesuan di mana mereka dapat hidup, tetapi tidak dapat diolah.
Referensi
- "Agar bergizi." Wikipedia, Ensiklopedia gratis. 13 Sep 2016, 20:33 UTC. 29 Des 2018, 21:04 en.wikipedia.org
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Editorial Panamericana S.A.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
- Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Pengaruh media kultur disiapkan dengan air laut pada indikator kesehatan di perairan laut spa Chichiriviche, negara Falcón, Venezuela. Rev Soc Ayo Mikrobiol 2013; 33: 122-128
- Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M dan Cardoso M. Kualitas mikrobiologis air untuk dosis inseminasi, untuk Suinos.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
- García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinis praktis. University of Cadiz, edisi ke-2. Layanan Publikasi UCA.