Persiapan, persiapan, dan penggunaan MacConkey Agar



itu Agar MacConkey Ini adalah media kultur padat yang memungkinkan isolasi eksklusif basil Gram negatif. Karena alasan ini, ia merupakan media selektif dan juga memungkinkan untuk membedakan antara basil fermentasi dan non-fermentasi laktosa, yang membuatnya menjadi media diferensial. Ini adalah salah satu media kultur yang paling banyak digunakan di laboratorium mikrobiologi.

Media ini digunakan terutama untuk isolasi basil Gram negatif milik keluarga Enterobacteriaceae, termasuk spesies oportunistik dan enteropatogenik.

Ini juga dapat digunakan untuk mengisolasi basil enterik lain yang menghuni saluran pencernaan, tetapi tidak termasuk dalam Enterobacteriaceae, sebagai Aeromonas sp, Plesiomonas sp, antara lain.

Akhirnya, dapat mengisolasi basil glukosa gram negatif dan non-fermentasi lainnya yang ditemukan di lingkungan, air atau tanah, tetapi yang kadang-kadang bisa menjadi patogen oportunistik seperti Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, antara lain.

Indeks

  • 1 Yayasan
    • 1.1 Agar MacConkey
  • 2 Persiapan
  • 3 Penggunaan agar MacConkey konvensional
  • 4 varian lain agar MacConkey
    • 4.1 Agar MacConkey dengan sorbitol
    • 4.2 Agar MacConkey tanpa kristal violet, atau garam
    • 4.3 Agar MacConkey dengan cefoperazone
    • 4.4 MacConkey Agar disiapkan dengan 10% air laut v / v
  • 5 Referensi

Yayasan

Agar MacConkey

Fondasi media ini dapat dijelaskan melalui deskripsi komponennya, karena masing-masing memiliki tujuan yang menentukan properti itu.

Garam empedu dan kristal violet

Dalam pengertian ini, agar MacConkey memiliki komposisi yang kompleks. Pertama-tama mengandung garam empedu dan kristal violet.

Elemen-elemen ini bertanggung jawab untuk menghambat pertumbuhan bakteri Gram-positif dan beberapa basil Gram-negatif. Pada gilirannya itu mendukung pengembangan basil Gram negatif yang tidak terpengaruh oleh zat-zat ini. Itu sebabnya ini adalah media selektif.

Dikatakan sedikit selektif dibandingkan dengan media lain yang juga menghambat pertumbuhan bakteri Gram-positif dan juga sebagian besar bakteri Gram-negatif..

Ini sangat selektif untuk genus tertentu, seperti agar TCBS untuk isolasi Vibrio cholerae dan spesies halofilik dan alkalofilik serupa lainnya.

Pepton, polipekton, dan laktosa

Mengandung zat-zat yang menyediakan nutrisi penting bagi mikroorganisme yang berkembang di media ini, seperti pepton, polipekton, dan laktosa..

Laktosa adalah titik kunci bagi media untuk menjadi media diferensial, karena mikroorganisme yang memiliki kemampuan untuk memfermentasi laktosa akan mengembangkan koloni merah muda yang kuat..

Beberapa bakteri dapat memfermentasi laktosa secara perlahan atau lemah, mengembangkan koloni merah muda pucat dan tetap positif laktosa.

Mereka yang tidak memfermentasi laktosa menggunakan pepton sebagai sumber energi, menghasilkan amonia, membuat alkali medium. Oleh karena itu, koloni yang berasal tidak berwarna atau transparan.

Indikator PH

Perubahan warna dicapai melalui senyawa esensial lain yang memiliki agar MacConkey. Senyawa ini adalah indikator pH, yang dalam hal ini berwarna merah netral.

Fermentasi laktosa menghasilkan produksi asam campuran. Mereka mengasamkan medium pada pH di bawah 6,8..

Ini menyebabkan indikator pH berubah menjadi rona merah muda yang intens. Intensitas warna dapat bervariasi tergantung pada pH akhir.

Air suling, natrium klorida dan agar-agar

Di sisi lain, mengandung air suling dan natrium klorida yang memberikan hidrasi dan keseimbangan osmotik ke medium. Akhirnya, media berisi agar, yang merupakan dasar yang menyediakan konsistensi media padat.

Media agar MacConkey yang disiapkan harus memiliki pH akhir yang disesuaikan hingga 7,1 ± 0,2..

Persiapan

Untuk satu liter agar MacConkey, 50 g media kering harus ditimbang, kemudian ditempatkan dalam fiola dan dilarutkan dalam satu liter air suling. Setelah 10 menit istirahat, dipanaskan dengan mencampurkan terus-menerus sampai mendidih selama 1 menit.

Kemudian masukkan fiola ke dalam autoclave dan sterilkan pada 121 ° C selama 20 menit. Pada akhirnya, ia dikeluarkan dari autoklaf dan dibiarkan dingin hingga suhu 45 ° C, kemudian disajikan dalam cawan petri steril di dalam tudung aliran laminar atau di depan pembakar Bunsen..

Biarkan mengeras dan disimpan dalam wadah piring terbalik dan dinginkan pada 2-8 ° C sampai digunakan.

Untuk mendapatkan agar MacConkey yang menghambat efek swarning yang dihasilkan oleh genus Proteus, garam MacConkey agar rendah digunakan..

Penggunaan agar MacConkey konvensional

Agar MacConkey termasuk dalam semua set media kultur yang diatur untuk disemai sampel klinis yang diterima di laboratorium. Ini juga berguna dalam mikrobiologi makanan dan mikrobiologi lingkungan.

Variasi basil Gram negatif yang tumbuh di media ini mengekspresikan karakteristik fenotipik yang membantu diagnosis dugaan spesies tersebut. Misalnya, ukuran, warna, konsistensi, dan bau koloni adalah beberapa karakteristik yang dapat memandu.

Di lingkungan ini, spesies Escherichia coli, Klebsiella sp dan Enterobacter sp menghasilkan koloni merah muda yang kuat, dikelilingi oleh area empedu yang diendapkan.

Sebanyak mungkin bakteri Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp dan Hafnia sp mereka dapat muncul tanpa warna setelah 24 jam atau merah muda pucat dalam 24 -48 jam.

Demikian juga, genus Proteus, Edwadsiella, Salmonella dan Shigella menghasilkan koloni yang tidak berwarna atau transparan.

Varian lain dari agar MacConkey

Ada varian lain agar MacConkey yang memiliki tujuan spesifik. Selanjutnya mereka disebutkan:

Agar MacConkey dengan sorbitol

Media ini dirancang untuk membedakan strain enteropatogenik (Escherichia coli enterohemorrhagic O157: H7) dari sisa strain Escherichia coli.

Media ini mengubah karbohidrat laktosa untuk sorbitol. Alunan dari E. coli enterohaemorrhagic O157: H7 berbeda dari yang lain karena mereka tidak memfermentasi sorbitol dan oleh karena itu koloni transparan diperoleh, namun sisa dari strain E. coli jika mereka memfermentasi sorbitol dan koloni berwarna merah muda yang kuat.

Agar MacConkey tanpa kristal ungu, atau garam

Agar ini sangat berbeda dari agar MacConkey klasik, karena tidak memiliki kristal ungu, bakteri Gram-positif dapat tumbuh.

Di sisi lain, tidak adanya garam menghambat penampilan mengerumuni agar-agar yang diproduksi oleh beberapa basil enterik, seperti genus. Proteus, dan dengan demikian memfasilitasi isolasi semua bakteri yang ada, termasuk bakteri Gram-positif.

Agar MacConkey dengan cefoperazone

Varian agar MacConkey ini dirancang untuk mengisolasi awalnya Laribacter hongkongensis dan kemudian mereka menyadari bahwa itu berguna untuk isolasi Arcobacter butzleri. AKeduanya basil Gram negatif yang sedikit melengkung tahan terhadap cefoperazone.

Bakteri-bakteri ini baru-baru ini dikaitkan sebagai penyebab gastroenteritis dan diare yang didapat pada orang-orang Asia dan Eropa, muncul sebagai dua patogen baru yang kuat..

Antibiotik memungkinkan untuk menghambat flora yang menyertai saluran pencernaan, yang mendukung perkembangan bakteri ini, mencegah mereka tidak diperhatikan, karena mereka membutuhkan 72 jam untuk tumbuh.

Agar MacConkey disiapkan dengan 10% air laut v / v

Varian ini berguna untuk evaluasi indikator kesehatan bakteri dari kontaminasi tinja, termasuk coliform total dan coliform fecal di perairan asin rekreasional (pantai dan teluk).

Cortez et al. 2013 menunjukkan bahwa media yang disiapkan dengan cara ini secara signifikan meningkatkan pemulihan mikroorganisme ini dalam lingkungan salin, dibandingkan dengan penggunaan agar MacConkey yang disiapkan dengan air suling..

Ini karena media modifikasi merangsang pertumbuhan bakteri yang secara fisiologis dalam keadaan dorman "layak tetapi tidak dapat dibudidayakan", oleh karena itu mereka tidak dapat dipulihkan dalam media konvensional..

Referensi

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, dkk. Penggunaan cefoperazone MacConkey agar untuk isolasi selektif Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
  2. "Agar MacConkey." Wikipedia, Ensiklopedia gratis. 4 Apr 2018, 18:16 UTC. 29 Des 2018, 15:22 en.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Argentina Editorial Panamericana S.A.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologis. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Pengaruh media kultur disiapkan dengan air laut pada indikator kesehatan di perairan laut spa Chichiriviche, negara Falcón, Venezuela. Rev Soc Ayo Mikrobiol 2013; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinis praktis. University of Cadiz, edisi ke-2. Layanan Publikasi UCA.