Cetrimida agar foundation, persiapan, penggunaan



itu agar setrimid atau cetrimide adalah media kultur padat selektif, yang dirancang untuk isolasi Pseudomonas aeruginosa. Itu didasarkan pada menyoroti produksi karakteristik pigmen dari spesies ini dan dikembangkan dari modifikasi agar Tech, yang dibuat oleh King, Ward dan Raney.

Formula aslinya mengandung garam magnesium klorida, kalium sulfat, pencernaan gelatin pankreas, dan agar-agar. Modifikasi formula terdiri dari penambahan setrimida (cetyl trimethyl ammonium bromide) dan gliserol.

Cetrimide agar berguna untuk studi mikrobiologi sampel di mana keberadaan Pseudomonas aeruginosa. Perlu dicatat bahwa bakteri ini sangat penting, karena meskipun merupakan bagian dari mikrobiota lingkungan normal, sering berperilaku seperti patogen oportunistik..

Oleh karena itu, salah satu masalah paling umum yang disebabkan oleh kuman ini adalah infeksi nosokomial, yaitu infeksi yang terjadi di lingkungan rumah sakit, menyerang pasien yang memiliki sistem kekebalan yang tertekan..

Di sisi lain, karena afinitas yang dimiliki mikroorganisme ini dengan kelembaban, target kontaminasi yang paling rentan adalah: alat bantu pernapasan, obat-obatan, nebuliser, sumber air, pendingin udara, disinfektan, larutan sabun, solusi injeksi, luka terbuka , kateter, kateter kemih, antara lain.

Dalam pengertian ini, agar setrimid berguna untuk melakukan kontrol mikrobiologis dan tanaman untuk unsur-unsur yang sebelumnya disebut.

Indeks

  • 1 Yayasan
    • 1.1 Interpretasi
  • 2 Persiapan
  • 3 Penggunaan
  • 4 Diunggulkan
  • 5 Keterbatasan
  • 6 Kontrol kualitas
  • 7 Referensi

Yayasan

Cetrimide agar didasarkan pada kemampuan medium untuk meningkatkan pertumbuhan P. aeruginosa, merangsang produksi pigmen mereka dan pada gilirannya menghambat pertumbuhan mikroorganisme lainnya.

Properti ini disebabkan oleh fungsi yang dipenuhi oleh masing-masing komponennya. Peptone gelatin hadir berfungsi sebagai sumber nitrogen, vitamin dan mineral. Gliserol atau gliserin berfungsi sebagai sumber karbon.

Untuk bagiannya, cetrimide (cetyl trimethyl ammonium bromide) adalah zat yang menghambat pertumbuhan bakteri lain daripada P. aeruginosa, termasuk spesies lain yang termasuk dalam genus yang sama.

Penghambatan terjadi karena cetramide bertindak sebagai deterjen kationik, mendestabilisasi membran plasma sebagian besar bakteri, dengan pengecualian P. aeruginosa dan beberapa lainnya yang berhasil bertahan hidup.

Di sisi lain, mengandung magnesium klorida dan kalium sulfat. Senyawa ini merangsang ekspresi fenotipik terkait dengan kapasitas Pseudomonas aeruginosa memproduksi berbagai pigmen, di antaranya: pyocyanin, pioverdin, piorubin, piomelanin dan fluorescein. Akhirnya, mengandung agar-agar, yang memberikan konsistensi yang solid.

Interpretasi

Interpretasi dari pertumbuhan yang diperoleh dalam agar ini dibuat dengan cara berikut:

Pengamatan terhadap koloni bulat dan halus dengan tepi yang teratur, menghasilkan pigmen biru-hijau, hijau, coklat atau kemerahan, ditambah emisi bau buah (aminoacetophenone), adalah hasil dugaan kehadiran bakteri ini dalam sampel tersebut..

Di sisi lain, ini merupakan indikasi P. aeruginosa pengamatan pigmen hijau kekuningan-cerah pada koloni ketika piring terkena sinar ultraviolet.

Perlu dicatat bahwa setiap warna yang diamati disebabkan oleh produksi pigmen tertentu. Pigmen biru-hijau berhubungan dengan produksi piocyanin, hijau untuk pioverdin, kemerahan ke piorrubin, coklat ke piomelanin dan fluoresensi hijau kekuningan-hijau terang di bawah sinar ultraviolet ke fluorescein.

Persiapan

Timbang 43 g medium kering dan larut dalam air suling. Tambahkan 10 ml gliserol. Bawa campuran ke sumber panas. Biarkan mendidih selama beberapa menit sampai larut sempurna.

Autoclave pada 121 ° C selama 15 menit. Diamkan dan sajikan dalam cawan petri steril ketika suhunya sekitar 50 ° C.

Biarkan mengeras, balikkan, pesan dalam plakat, dan simpan di lemari es sampai digunakan. Untuk menanam agar agar cetrimide, mereka harus dikeluarkan dari kulkas terlebih dahulu dan dibiarkan mengambil suhu ruangan..

PH akhir medium harus 7,2 ± 0,2.

Warna media dehidrasi adalah krem ​​dan sediaan putih buram.

Penggunaan

Cetrimide agar dapat digunakan untuk menanam semua jenis sampel yang keberadaannya Pseudomonas aeruginosa. Oleh karena itu, berguna di semua bidang mikrobiologi (lingkungan, industri, klinis, air dan makanan).

Sangat penting untuk menganalisis lingkungan rumah sakit dan dengan demikian dapat menerapkan mediasi korektif, karena mikroorganisme ini menjangkau pasien melalui peralatan, obat-obatan, solusi dan persediaan yang terkontaminasi yang digunakan oleh pasien..

Dengan cara ini, mikroorganisme dapat menginfeksi saluran pernapasan bagian bawah, saluran kemih dan luka pada pasien yang mengalami imunosupresi..

Penghitungan koloni juga dapat dilakukan P. aeruginosa dalam tes batas mikroba.

Ditaburkan

Cetrimide agar dapat digunakan sebagai kultur primer. Piring diinokulasi di salah satu ujungnya dan dari sana didistribusikan oleh kelelahan ke seluruh piring. Sampel cair dapat ditaburkan di permukaan dengan spatula drigalski.

Pelat diinkubasi dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C selama 24 jam inkubasi.

Keterbatasan

-Persentase kecil dari strain  Pseudomonas aeruginosa jangan memproduksi pyocyanin, jadi Anda bisa mengartikan negatif palsu.

-Beberapa spesies Pseudomonas yang penting secara klinis dihambat dalam medium ini.

-Meskipun mengamati karakteristik yang dijelaskan untuk Pseudomonas aeruginosa, mereka harus dikuatkan dengan tes identifikasi tambahan. Tes yang tidak boleh dilewatkan adalah tes oksidase, itu harus positif.

-Beberapa enterobacteria dapat tumbuh di media ini dan mengembangkan pigmen kuning, tetapi berbeda Pseudomonas aeruginosa di mana ketika mengarahkan piring ke sinar ultraviolet tidak ada fluoresensi.

-Serratia marcescens berhasil mengembangkan dan menghasilkan pigmen merah muda.

-Jika plak yang diunggulkan dengan agar setrimid terpapar untuk beberapa saat pada suhu kamar, galur dari P. aeruginosa mereka dapat kehilangan fluoresensi yang diamati di bawah sinar ultraviolet, namun sifatnya pulih jika diinkubasi kembali pada suhu 37 ° C.

Kontrol kualitas

Untuk menguji berfungsinya cetrimide agar, strain kontrol dapat digunakan, seperti: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 dan Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Hasil yang diharapkan adalah:

  • Untuk P. aeruginosa pertumbuhan yang baik, dengan pigmen biru kehijauan dan fluorescein positif.
  • S. maltophilia dan S. aureus akan terhambat sebagian atau seluruhnya.
  • Diharapkan begitu Escherichia coli sepenuhnya terhambat.

Referensi

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callis A, Esnard S. Phenotypic dan karakterisasi serologis isolat klinis dari Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Laboratorium Conda Pronadisa. Basis agar Cetrimide. 2014. Tersedia di: condalab.com
  3. Laboratorium Britania. Agar Cetrimida. 2015. Tersedia di: britanialab.com
  4. Laboratorium BD BD Pseudosel agar (Cetrimide agar). 2013. Tersedia di: bd.com
  5. Laboratorium Francisco Soria Melguizo, C.A. Agar Cetrimide. 2009. Tersedia di: http://f-soria.es