Apa itu Pewarnaan Sederhana? Fitur Top



itu pewarnaan sederhana adalah prosedur pewarnaan cepat dan sederhana di mana pewarna tunggal digunakan, itu sebabnya disebut pewarnaan sederhana. Ini terutama digunakan untuk menentukan morfologi dan organisasi sel yang ada dalam sampel.

Secara alami sel-sel tidak memiliki warna, jadi perlu untuk membuatnya terlihat dalam beberapa cara ketika mereka diamati dalam mikroskop.

Penting untuk ditekankan bahwa pewarna yang digunakan dalam pewarnaan sederhana harus dasar dengan muatan positif (kationik), sehingga pewarna tersebut dapat secara spontan mengikat ke dinding sel dan sitoplasma.

Struktur seluler ini bermuatan negatif. Inilah sebabnya mengapa pewarna, bermuatan positif, tertarik ke sel dan mengikatnya secara spontan. Dengan demikian, semua sel yang ada dalam sampel berwarna cepat.

Pewarna digunakan untuk pewarnaan sederhana

Ada beberapa pewarna dasar yang dapat digunakan di laboratorium mikrobiologi. Yang paling banyak digunakan adalah:

- Metilen biru.

- Kristal ungu.

- Hijau perunggu.

- Fuchsin dasar.

Semua pewarna ini bekerja dengan baik pada bakteri karena mereka memiliki ion berwarna (kationik) bermuatan positif (kromofor).

Waktu pewarnaan untuk sebagian besar pewarna ini relatif singkat. Mereka biasanya berkisar dari 30 detik hingga 2 menit, tergantung pada afinitas pewarna.

Penting untuk diingat bahwa sebelum mewarnai sampel dengan pewarnaan sederhana, harus diperluas dan diperbaiki ke kaca slide (slide); Sampel yang diperluas dan diperbaiki disebut apusan.

6 langkah untuk melakukan pewarnaan sederhana

Langkah 1

Tempatkan slide pada rak pewarnaan dan oleskan pewarna yang diinginkan. Biarkan waktu yang sesuai.

Biasanya, pewarnaan sederhana membutuhkan beberapa detik atau beberapa menit, tergantung pada pewarnaan yang digunakan.

Pengamatan

Pada langkah ini penting untuk tidak melebihi waktu yang disarankan untuk pewarna yang digunakan, karena kristal dapat terbentuk pada lembaran, menghasilkan apa yang dikenal sebagai "artefak" yang merusak morfologi sel..

Langkah 2

Cuci smear slide dengan hati-hati dengan air suling dari botol, atau juga dengan air keran yang mengalir perlahan, sampai limpasan menjadi transparan. Ini biasanya membutuhkan waktu 5 hingga 10 detik.

Pengamatan

Jangan menerapkan aliran air langsung pada apusan, untuk mencegah kekuatan yang sama merusak sampel.

Jika Anda tidak memiliki air suling, Anda dapat menggunakan air ledeng tanpa masalah karena itu tidak akan mempengaruhi hasil pewarnaan.

Langkah 3

Keringkan slide dengan handuk kertas penyerap dalam satu arah dan tanpa menggosok. Pastikan bagian bawah slide bersih.

Langkah 4

Amati apusan bernoda di mikroskop. Mulailah dengan tujuan yang paling jauh untuk menemukan dengan tepat area yang ingin Anda amati lebih detail. Ubah tujuan untuk menjadi lebih dekat dan lebih dekat dengan sampel.

Pengamatan

Untuk penggunaan lensa dengan perbesaran tertinggi (biasanya 100X), minyak imersi harus digunakan, karena membantu cahaya menembus lebih baik dan gambar menjadi lebih tajam. Tidak perlu menggunakan coverlip.

Langkah 5

Terakhir, buang semua sampel dalam wadah yang sesuai yang dilabeli dengan benar sebagai "biohazard".

Referensi

  1. (2001). Aplikasi Mikrobiologi: Manual Laboratorium dalam Mikrobiologi Umum (8 th ed.). Perusahaan Bukit McGraw.
  2. Harisha, S. (2006). Pengantar Bioteknologi Praktis (1st). Media Firewall.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D. P. (2009). Pewarnaan awal bakteri: Noda sederhana. Protokol saat ini dalam Mikrobiologi, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Dasar-Dasar Laboratorium Mikrobiologi Alcamo (10th). Jones & Bartlett Belajar.
  5. Prescott, H. (2002). Latihan Laboratorium dalam Mikrobiologi (5 th). Perusahaan Bukit McGraw.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Prinsip Mikrobiologi (1st). Pendidikan Tata McGraw-Hill.