Jenis tes biokimia, untuk apa dan pentingnya



itu tes biokimia dalam mikrobiologi mereka adalah seperangkat tes kimia yang dilakukan pada mikroorganisme yang ada dalam sampel untuk mengidentifikasi mereka; Mikroorganisme ini biasanya adalah bakteri. Ada sejumlah besar tes biokimia yang tersedia untuk ahli mikrobiologi.

Namun, pilihan tes ini didasarkan pada temuan awal, seperti pola pewarnaan Gram dan karakter pertumbuhan, yang memungkinkan bakteri untuk ditugaskan ke kategori tertentu. Tes biokimia terutama didasarkan pada sifat metabolisme dari setiap jenis bakteri. 

Tidak semua bakteri memiliki sifat yang sama, sehingga diselidiki jika mereka memiliki enzim tertentu dengan menambahkan substrat dan menunggu reaksi terjadi. Umumnya penentuan ini diberikan oleh perubahan warna atau pH dalam media kultur.

Kurang dari 15 uji biokimia sering diperlukan untuk identifikasi bakteri hingga tingkat spesies. Melakukan lebih banyak tes biokimia dapat meningkatkan kepercayaan dalam identifikasi.

Sebagian besar tes biokimia ini dilakukan dalam serum atau plasma darah. Namun, mereka juga dapat dilakukan di sekresi biologis lainnya seperti urin, cairan serebrospinal, cairan pleura, dan feses..

Indeks

  • 1 Klasifikasi
    • 1.1 Universal
    • 1.2 Perbedaan
    • 1.3 Khusus
  • 2 Jenis tes biokimia
    • 2.1 Uji katalase
    • 2.2 Uji oksidase
    • 2.3 Tes Asin Mannitol Agar (MSA)
    • 2.4 Tes koagulase
    • 2.5 Tes urease
  • 3 Untuk apa tes biokimia itu??
  • 4 Pentingnya
  • 5 Referensi

Klasifikasi

Tes biokimia dapat diklasifikasikan menjadi 3 kelompok:

Universal

Ini adalah tes yang dapat dilakukan pada sampel apa pun dan yang memandu ahli mikrobiologi pada tes biokimia berikut yang harus dilakukan untuk mendapatkan identifikasi yang andal..

Contoh

Uji katalase dan oksidase.

Diferensial

Ini adalah tes yang dilakukan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang ada dalam sampel hingga tingkat spesies.

Identifikasi dibuat berdasarkan hasil kombinasi tes, karena hasil individu tidak cukup informatif untuk membuat identifikasi.

Contoh

Tes IMViC dan tes pemanfaatan gula.

Spesifik

Mereka adalah tes khusus untuk set spesies tertentu atau untuk subtipe spesies. Tes-tes ini biasanya dilakukan untuk mengkonfirmasi atau mengidentifikasi pada tingkat subspesies. Tes individu informatif sendiri.

Contoh

Tes γ-Glutamyl aminopeptidase.

Jenis tes biokimia

Uji katalase

Uji katalase adalah tes untuk menunjukkan keberadaan enzim katalase dengan mendekomposisi hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Sejumlah kecil bakteri ditambahkan ke setetes hidrogen peroksida (3%) pada slide.

Uji katalase adalah tes sederhana yang digunakan oleh ahli mikrobiologi untuk membantu mengidentifikasi spesies bakteri dan untuk menentukan kemampuan beberapa mikroba untuk memecah hidrogen peroksida dengan menghasilkan enzim katalase..

Jika gelembung oksigen diamati, itu berarti bahwa bakteri memiliki enzim katalase, karena mengkatalisis penguraian hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Dikatakan kemudian bahwa organisme bersifat katalase positif (misalnya: Staphylococcus aureus).

Tes oksidase

Tes ini digunakan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang mengandung enzim sitokrom oksidase (penting dalam rantai transpor elektron). Ini biasanya digunakan untuk membedakan antara keluarga Enterobacteriaceae dan Pseudomadaceae.

Sitokrom oksidase mentransfer elektron dari rantai transpor elektron ke oksigen (akseptor elektron akhir) dan menguranginya menjadi air. Tes oksidase menyediakan molekul donor dan akseptor elektron buatan.

Ketika donor elektron dioksidasi oleh aksi sitokrom oksidase, medianya menjadi ungu gelap dan dianggap sebagai hasil positif. Mikroorganisme Pseudomonas aeruginosa adalah contoh dari bakteri oksidase positif.

Tes Asin Mannitol Agar (MSA)

Jenis tes ini selektif dan diferensial. MSA akan memilih organisme yang mampu hidup di lingkungan dengan konsentrasi garam tinggi, seperti spesies Staphylococcus berbeda dengan spesies Streptococcus, yang pertumbuhannya terhambat dalam kondisi ini.

Komponen diferensial dalam tes ini adalah gula manitol. Organisme yang mampu menggunakan manitol sebagai sumber makanan akan menghasilkan produk sampingan fermentasi, yang bersifat asam dan, karenanya, akan menurunkan pH medium..

Keasaman medium menyebabkan indikator pH, fenol merah, menjadi kuning. Contoh spesies bakteri yang dapat dibedakan dengan metode ini adalah: Staphylococcus aureus (positif karena fermentasi mannitol) dan Staphylococcus epidermidis (negatif karena manitol tidak berfermentasi).

Tes koagulase

Coagulase adalah enzim yang membantu membekukan plasma darah. Tes ini dilakukan pada bakteri gram positif dan katalase positif untuk mengidentifikasi Staphylococcus aureus (koagulase positif) Faktanya, koagulase adalah faktor virulensi dari spesies bakteri ini.

Pembentukan gumpalan di sekitar infeksi yang disebabkan oleh bakteri ini mungkin melindunginya dari fagositosis. Tes ini sangat berguna ketika Anda ingin membedakannya Staphylococcus aureus dari spesies lain dari Staphylococcus yang merupakan koagulase negatif.

Tes urease

Tes ini digunakan untuk mengidentifikasi bakteri yang mampu menghidrolisis urea, menggunakan enzim urease. Biasanya digunakan untuk membedakan jenis kelamin Proteus bakteri enterik lainnya.

Hidrolisis urea menghasilkan amonia sebagai salah satu produknya. Basa lemah ini meningkatkan pH medium di atas 8,4 dan indikator pH (fenol merah) berubah dari kuning menjadi merah muda. Contoh bakteri urease positif adalah Proteus mirabilis.

Untuk apa tes biokimia itu??

Tes biokimia dalam mikrobiologi digunakan untuk mendiagnosis penyakit yang disebabkan oleh mikroba dan untuk memantau perawatan yang diberikan untuk memerangi mereka. Selain itu, mereka digunakan untuk skrining penyakit menular dan untuk prognosisnya..

Identifikasi biokimia mikroorganisme menawarkan gagasan tentang apa yang mampu dilakukan mikroorganisme ini, menjadi mungkin diskriminasi dari strain berbeda dari spesies yang sama oleh profil biokimia spesifik.

Perbedaan dalam aktivitas enzimatik spesifik menginformasikan tentang ekologi, fisiologi atau habitat alami mikroorganisme, yang dalam beberapa kasus dapat dianggap informasi penting.

Signifikansi

Perbedaan struktural sehubungan dengan bentuk, ukuran dan disposisi bakteri sangat membantu dalam proses identifikasi, karena ada banyak spesies bakteri yang memiliki bentuk, ukuran, dan disposisi yang sama..

Untuk alasan ini, akhirnya identifikasi bakteri didasarkan terutama pada perbedaan dalam aktivitas biokimia mereka.

Setiap spesies bakteri memiliki serangkaian aktivitas metabolisme yang berbeda dari semua spesies lainnya. "Sidik jari" biokimia ini adalah sifat-sifat yang dikendalikan oleh enzim bakteri.

Dengan demikian, tes biokimia penting karena membantu peneliti mengidentifikasi dengan benar patogen yang ada dalam sampel dan, dengan cara ini, untuk dapat merekomendasikan perawatan yang tepat kepada pasien..

Referensi

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Biokimia Klinis (Edisi ke-8). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Metode biokimia untuk bakteriologi. Jurnal Mikrobiologi Umum, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Biokimia Klinis (Edisi ke-5). Ilmu Kesehatan Elsevier.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Buku Pegangan Praktik Mikrobiologi (2nd ed.). CRC Tekan.
  5. Harrigan, W. (1998). Metode Laboratorium dalam Mikrobiologi Makanan (Edisi ke-3). Pers Akademik.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Mikrobiologi Praktis. Publikasi BI Pvt Ltd.