Persiapan media budaya apa yang terdiri dari, tujuan dan langkah-langkahnya



itu persiapan media budaya Ini adalah metodologi rutin yang digunakan di laboratorium untuk pertumbuhan mikroorganisme yang diinginkan. Media kultur adalah persiapan padat, cair atau semi-padat yang memiliki semua nutrisi yang diperlukan untuk pengembangan populasi mikroba.

Secara umum, sarana untuk menumbuhkan mikroorganisme kaya akan protein dan asam amino dan biasanya mengandung beberapa komponen yang mendukung pertumbuhan organisme yang ingin Anda pelajari, seperti vitamin, darah, serum, dan lainnya..

Tidak ada media kultur umum atau universal, karena komposisinya bervariasi sesuai dengan kebutuhan mikroorganisme yang diminati. Beberapa bakteri dapat berkembang di media kultur apa saja, tetapi yang lain memiliki persyaratan khusus.

Indeks

  • 1 Terdiri dari apakah itu??
    • 1.1 Agar
    • 1.2 Cairan
    • 1.3 Ekstrak
    • 1.4 Peptones
    • 1.5 Peredam kejut
  • 2 Tujuan
  • 3 Jenis media
    • 3.1 Berdasarkan komposisinya
    • 3.2 Berdasarkan jenis mikroorganisme
  • 4 Langkah
  • 5 Referensi

Terdiri dari apa itu??

Mikroorganisme, seperti jamur dan bakteri, tidak dapat dipelajari secara individual karena ukurannya yang kecil. Oleh karena itu, mereka harus dibudidayakan dengan cara buatan yang memungkinkan peningkatan populasi yang signifikan.

Misalnya, jika kita ingin mempelajari bakteri, kita harus menyediakan mereka dengan kondisi yang tepat sehingga mereka dapat berkembang biak dan membentuk koloni (yang dapat diamati dengan mata telanjang).

Persiapan media kultur sangat bervariasi tergantung pada jenis mikroorganisme yang ingin dipupuk. Sebelum menyiapkannya, perlu diketahui kebutuhan nutrisi dasar tubuh kerja.

Selanjutnya, komponen yang paling umum digunakan dalam media kultur akan dideskripsikan untuk memiliki gagasan umum tentang persiapannya:

Agar

Ini digunakan dalam tanaman sebagai agen pembentuk gel dan ditambahkan ketika mencari media padat atau semi-padat. Agen pemadat pertama yang digunakan dalam persiapan media adalah gelatin, tetapi pada tahun 1883 agar diperkenalkan ke dunia bakteriologi oleh W. Hesse.

Agar bakteriologis memiliki komponen utama polisakarida dari cabang kompleks yang diekstraksi dari ganggang. Senyawa ini digunakan sebagai pengental untuk makanan umum seperti es krim dan selai.

Ini adalah elemen yang sangat berharga dalam mikrobiologi karena beberapa alasan. Terutama karena mikroorganisme tidak dapat mendegradasinya, mencair pada suhu 100 ° C dan tetap dalam keadaan cair hingga mencapai 45 ° C atau kurang.

Jika Anda ingin menyiapkan media padat, konsentrasi agar-agar harus sekitar 1,5%, sedangkan semi-padat harus disiapkan dari 0,3 hingga 0,5%.

Cairan

Budidaya organisme patogen membutuhkan cairan tubuh sehingga mereka dapat berkembang seperti di lingkungan alami mereka. Untuk alasan ini, darah utuh atau defibrilasi ditambahkan. Cairan diekstraksi dari hewan yang sehat dan, setelah disterilkan, ditambahkan ke media kultur.

Ekstrak

Mereka diperoleh dari bagian hewan yang berbeda (seperti daging atau hati) atau sayuran (biji) dan diproses untuk mendapatkan konsentrat padat dalam bentuk pasta atau bubuk. Yang paling umum adalah ragi, malt dan daging.

Pepton

Senyawa organik ini diperoleh dengan hidrolisis enzimatik atau kimiawi dari jaringan hewan atau sayuran. Tujuannya adalah untuk menambahkan konten yang kaya akan asam amino, yang merupakan unit dasar protein.

Peredam kejut

Buffer atau sistem buffer menghindari perubahan pH yang tiba-tiba dan membantu mempertahankan rentang optimal yang ditoleransi tubuh.

Sebagian besar organisme dapat berkembang dengan baik pada pH 7, meskipun beberapa bakteri lebih suka media alkali. Namun, ada bakteri yang menahan variasi pH antara nilai 6 dan 9.

Pada spesies yang peka terhadap pH, kerusakan tidak dihasilkan oleh jumlah berlebihan ion hidrogen atau hidroksil, tetapi oleh peningkatan asam lemah atau basa yang dapat menembus sel..

Juga, indikator bahwa pH untuk memonitornya dan menghindari penyimpangan yang disebabkan oleh fermentasi atau proses lainnya ditambahkan.

Tujuan

Tujuan utama ketika menyiapkan media kultur adalah untuk menambahkan semua komponen yang diperlukan untuk memungkinkan keberhasilan pengembangan organisme yang ingin diisolasi. Kombinasi komponen dan nutrisi yang paling efektif harus diidentifikasi untuk mencapai media yang diinginkan.

Persiapan dan penyimpanan media sangat penting untuk memastikan pertumbuhan yang sukses, karena langkah-langkah ini tergantung pada komposisi lingkungan dan ketersediaan nutrisi..

Harus diperhitungkan bahwa budidaya mikroorganisme adalah tugas yang dipengaruhi oleh beberapa faktor di luar media kultur, seperti intensitas cahaya yang diterima, suhu dan tingkat keasaman atau alkalinitas medium. Oleh karena itu, masing-masing variabel ini harus diperhitungkan.

Jenis media

Berdasarkan komposisinya

Berdasarkan komposisinya ada tiga jenis utama tanaman: alami atau empiris, semi-sintetik dan sintetis atau kimia berarti.

Lingkungan alam

Di lingkungan alami, komposisi pasti tidak diketahui. Ini termasuk bahan-bahan seperti susu, darah encer, jus sayuran, ekstrak dan infus daging dan pepton. Untuk alasan ekonomi, komponen biaya rendah sering ditambahkan seperti ekstrak kedelai, whey, molase, dll..

Media semi-sintetis

Disebut media semi-sintetik jika komposisi sebagian diketahui. Setiap media yang mengandung agar menjadi media semi-sintetis.

Di antara mereka kami memiliki agar papa dextrose, agar czapek-dox, agar oat, agar daging pepton, di antara contoh lainnya.

Media sintetis atau kimia

Dalam hal ini komposisi medium - dalam hal jumlah karbon, nitrogen, belerang, fosfor dan sumber faktor pertumbuhan lainnya - diketahui sepenuhnya. Ini sangat berguna jika Anda ingin mendapatkan hasil yang dapat direproduksi untuk peneliti lain.

Untuk apa yang disebut "mikroorganisme dengan persyaratan pertumbuhan khusus" perlu ditambahkan komponen yang diperlukan. Contoh dari jenis ini adalah Lactobacillus.

Berdasarkan jenis mikroorganisme

Demikian pula, ada klasifikasi lain untuk media kultur berdasarkan jenis mikroorganisme yang dapat tumbuh di dalamnya. Mengikuti prinsip ini, kami memiliki sarana pengayaan umum, selektif dan diferensial. Masing-masing dijelaskan di bawah ini:

Sarana umum

Ini mengakui perkembangan berbagai mikroorganisme. Jika suatu organisme membutuhkan kondisi khusus untuk pertumbuhannya, ia tidak akan dapat berkembang dengan sukses pada jenis tanaman ini.

Pengayaan berarti

Sarana pengayaan mendukung pertumbuhan jenis mikroorganisme tertentu, tetapi tidak ada zat yang ditambahkan untuk mencegah jenis mikroba lain tumbuh di dalamnya..

Media selektif

Mereka mencari pertumbuhan spesifik mikroorganisme, sebut saja jamur, bakteri, protozoa, dan lainnya. Untuk melakukan ini, mereka menghambat perkembangan orang lain.

Untuk mencapai tujuan ini dapat ditambahkan senyawa kimia yang mematikan untuk sekelompok besar mikroorganisme dan tidak berbahaya bagi organisme yang diminati atau menambahkan sumber energi yang hanya dapat diasimilasi oleh mikroba yang dicari..

Media selektif digunakan ketika mengambil sampel medis untuk menumbuhkan mikroorganisme patogen. Di sini perlu untuk mendukung pertumbuhan patogen dan menghambat perkembangan flora mikroba normal dari pasien.

Bismut sulfit agar, misalnya, tidak memungkinkan pertumbuhan bakteri gram positif dan sejumlah besar bakteri yang ditemukan di rongga pencernaan. Oleh karena itu, digunakan untuk membudidayakan bakteri gram negatif yang menyebabkan demam tifoid, Salmonella typhi dalam sampel tinja.

Media diferensial

Jenis ini menggunakan beberapa fitur diagnostik dari organisme yang diminati (kekhasan dalam metabolisme, misalnya) untuk dapat mengidentifikasi mereka terhadap spesies lain yang tumbuh di lingkungan yang sama..

Baik media diferensial dan media selektif sangat berguna di bidang mikrobiologi klinis dan kesehatan masyarakat, karena disiplin ilmu ini perlu mendeteksi keberadaan mikroorganisme spesifik yang terkait dengan kondisi atau kondisi kebersihan yang buruk..

Zat indikator dapat ditambahkan ke tanaman yang memberikan karakteristik khas pada koloni yang diinginkan. Misalnya, agar-eosin-metilen biru (disingkat EMB) dan MacConkey-agar ditambahkan dengan laktosa dan indikator pH.

Jadi, ketika sebuah koloni dikembangkan dalam media ini dengan kemampuan untuk memfermentasi laktosa dan menghasilkan aldehida, mereka dapat diamati dalam warna khusus..

Langkah-langkah

Saat ini media kultur dapat dibeli dalam bentuk terliofilisasi. Oleh karena itu, persiapan difasilitasi dan hanya produk yang direhidrasi. Konten harus ditimbang (dengan mempertimbangkan jumlah akhir yang ingin Anda siapkan) dan dilarutkan dalam air suling mengikuti semua indikasi produk.

Isi media cair harus dibagi ke dalam wadah yang diinginkan (cawan Petri, tabung, dll.) Untuk sterilisasi selanjutnya. Untuk mendistribusikan media padat itu perlu untuk melelehkannya menggunakan microwave atau dengan menundukkan material ke bak air. PH media harus disesuaikan.

Biasanya agar digunakan di tabung reaksi atau di cawan Petri. Jika agar mengeras dalam posisi miring, dengan sudut yang sesuai sehingga ujung terminal akhir diagonal, pengaturan ini dikenal sebagai puncak seruling atau tabung miring. Ketika agar mengeras dalam posisi sepenuhnya vertikal itu disebut "dalam".

Setelah mensterilkan media - menggunakan autoclave - mereka dibiarkan dingin. Ini harus ditangani di lingkungan yang bebas dari mikroorganisme, yang paling umum adalah bekerja dengan pemantik api yang memastikan lingkungan aseptik di sekitarnya..

Referensi

  1. Celis, J. E. (2006). Biologi sel: buku pegangan laboratorium (Vol. 2). Elsevier.
  2. Finegold, S.M., Bailey, W.R., Baron, E.J., Fineglod, S.M., & Scott, E.G. (1991). Bailey Scott: diagnosis mikrobiologis. Pan American Medical.
  3. Olivas, E. (2004). Manual Praktek Mikrobiologi I dan II dan Parasitologi. Universitas Otonomi Ciudad Juárez.
  4. Schlegel, H. G., & Zaborosch, C. (1993). Mikrobiologi umum. Cambridge University Press.
  5. Tortora, G. J., Funke, B. R., & Case, C. L. (2007). Pengantar mikrobiologi. Ed. Panamericana Medical.